小鼠ELISA試劑盒操作要素對(duì)ELISA試劑盒的影響ELISA試劑盒測(cè)定進(jìn)程：
固相包被→加待測(cè)樣品→溫育→洗刷+加酶標(biāo)物→溫育→洗刷→加底物→溫育一加間斷液→比色→斷定效果。
ELISA試劑盒操作較冗繁,在操作中應(yīng)留神以下5個(gè)方面。
1. 在成批手工檢測(cè)中，還應(yīng)留神操作時(shí)差的影響。加樣及混勻時(shí)刻的差異，使抗原抗體反響和酶促反響時(shí)刻不一起，對(duì)競(jìng)爭(zhēng)法及定量檢測(cè)影響很大，不留神可能會(huì)導(dǎo)致差錯(cuò)效果或定量禁絕。
2. 洗刷是ELISA試劑盒操作進(jìn)程中決議試驗(yàn)成敗的一個(gè)要害進(jìn)程。意圖是除去未結(jié)合的免疫反響物，間斷抗原抗體反響，除去標(biāo)本中與反響無(wú)關(guān)的成分、游離的酶標(biāo)物以及反響進(jìn)程中吸附于固相載體上的非特異性物質(zhì)。可用洗板機(jī)洗板或手工洗板，前者洗刷質(zhì)量較好，各反響孔洗刷效果均一，批內(nèi)、批間差異小，手工洗板應(yīng)留神控制各孔洗刷效果，差異不宜太大。
3. 跟著病況的開展或由其他要素影響，某些抗體在機(jī)體內(nèi)的含量發(fā)作大幅不堅(jiān)定，因此有必要對(duì)標(biāo)本進(jìn)行預(yù)處理。直接法測(cè)定中，標(biāo)本恰當(dāng)稀釋還可下降非特異性反響。
4. 加樣一般運(yùn)用加液器，在ELISA試劑盒中一般有4次加樣：加標(biāo)本、加酶結(jié)合物、加底物和加間斷液。加標(biāo)本時(shí)有必要每份標(biāo)本運(yùn)用一支移液器吸嘴，避免穿插污染。加酶結(jié)合物、底物和間斷液時(shí)則不需更換吸嘴。
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